支氣管哮喘（以下簡稱哮喘）是由炎性細胞（嗜酸 性粒細胞、中性粒細胞）、氣道結構細胞、氣道平滑 肌細胞和細胞組分共同參與的慢性氣道炎癥性疾病。GINA 2016 版定義哮喘為一種以慢性氣道炎癥和 氣道高反應性為特征的異質性疾病。目前，作為哮 喘控制治療的第一線藥物，吸入糖皮質激素（ICS）雖然可以顯著改善兒童哮喘的癥狀，但并不能改變疾 病的自然進程，且不能預防哮喘的復發 ，如何減輕 氣道炎癥、改善氣道重塑，從而防治哮喘，是臨床 上亟需解決的問題。

3 周齡 SD 雄性大鼠，清潔 級，體質量（95±5）g，由廣州中醫藥大學動物實驗中 心提供，許可證號：SCXK（粵）2013-0034。采用簡 單隨機分配法，分成 4 組：空白對照組、模型對照 組、參苓白術散組及地塞米松組，每組 10 只。本實 驗對動物的處理符合動物倫理學要求。

參苓白術散按 《太平惠民合劑局 方》所記載的原方比例：蓮子肉 10 g、薏苡仁 10 g、 砂仁 10 g、桔梗 10 g、白扁豆 15 g、茯苓 15 g、人 參 10 g、甘草 10 g、白術 15 g、山藥 15 g。復方各 成分藥由廣州中醫藥大學第一附屬醫院提供，用單 蒸水洗滌后，在三角瓶中加 4 倍體積的三蒸水浸泡 2 h，煎 2 次，每次煎 30 min，去渣，兩煎液混合， G4 濾器過濾，于 60 ℃水浴中濃縮成每毫升含原藥材 1 g，密封隔水煮沸備用。 地塞米松混懸液：天平稱取 10 mg 地塞米松干 粉，加入無水乙醇少許，并充分溶解，最后加入生 理鹽水至 50 mL，避光保存于 3~4 ℃冰箱。地塞米松 干 粉 購 自 廣 州 賽 國 生 物 有 限 公 司 ， 國 藥 準 字 ： H14021152。 1%卵白蛋白（ovalbumin，OVA）生理鹽水溶液：天 平稱取適量的 OVA 干粉，用生理鹽水溶液充分溶解，使 1 mL 液體中含 OVA 10 mg，每次用前臨時配 制。OVA 購自北京綠生源科技有限公司，批號： A5253。0.1％OVA+Al（0H）3 混合液：天平稱取適量 的 OVA 干粉，用少許生理鹽水溶解均勻，然后用濾 菌器（0.22 μm）濾入到將 NaOH、AlCl3 按 3∶l 的摩爾 比混合的 Al（OH）3 溶液中，并加生理鹽水進行稀 釋，使每 1.5 mL 的混合液中包含 1 mg OVA 和 100 mg Al（OH）3凝膠，每次用前臨時配制。 酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒：包括大鼠白 細胞介素-10（IL-10）、大鼠白細胞介素-17（IL-17）、 大鼠轉化生長因子-β1（TGF-β1）試劑盒，購自美國 R&D Systems 公司，批號為 EK-M20157。

BSA223S-CW 萬分之一電子天平，上海菁海儀器有限公司；LX 300 型低速迷你離心機，海門市其林貝爾儀器制造有限公司； JW-3021HR 高速臺 式冷凍離心機，安徽嘉文儀器裝備有限公司；ST360 酶標儀，上海科華儀器有限公司；Neg-50 恒溫 冰凍切片機，Thermo scientific 公司；55I 生物顯微 鏡，日本 Nikon 公司；Image-Pro Plus7 彩色圖像分 析系統，美國 Media Cybernetics 公司。

通過致敏和霧化激發，成功復制大 鼠哮喘模型，造模方法 如下：

1、致敏：哮喘各組 大鼠分別在第 1 天和第 8 天腹腔注射 0.1％OVA（100 mg）+Al（OH）3（100 mg）混合液 1 mL 致敏，空白對照 組以生理鹽水代替致敏液；

2、霧化激發：哮喘各組 大鼠第 15 天起以 1% OVA 霧化激發，空白對照組以 生理鹽水代替致敏液，隔天 1 次，每次 30 min，連 續 4 周。大鼠復制成功模型可出現呼吸急促，口唇 發紺，腹肌抽搐，站立不穩的現象。霧化第 1 天開始 同時給藥，參苓白術散組以每次 15 g·kg-1 、25 mL·kg-1 的給藥量經口灌服；地塞米松組以每次 5 g·kg- 1 、 25 mL·kg-1 的藥量經口灌服；模型組及空白對照組均 灌服生理鹽水 25 mL·kg- 1 。以上各組給藥均為 1 次·d-1 ，連續 4 周，療程結束 24 h 后處死大鼠取材， 其中模型組有 2 只在療程結束前已死亡。

包括毛發、呼吸、活 動量、食量、體質量、不良反應等。

（bronchial alveolar lavage fluid，BALF）細胞計數 BALF 制備：處死大鼠，取 仰臥位，打開胸腔，用留置針行氣管插管，結扎右 側主支氣管，0.3 mL 生理鹽水灌洗 3 次，BALF 4 ℃、4 000 r·min-1 離心 10 min，取上清液，-20 ℃ 保存備用；BALF 中細胞沉淀用 PBS 重懸，并涂片作 瑞氏姬姆薩染色，于 400 倍鏡下隨機選取 3 個視野，分別進行白細胞總數、嗜酸性粒細胞、中性粒 細胞計數，計算每高倍鏡視野下各類細胞數目平均 值并記錄。

見表 1。各組大鼠 在給藥前體質量無明顯差異，給藥后參苓白術散 組、地塞米松組大鼠生理狀態、哮喘癥狀均好轉， 體質量與模型對照組相比明顯升高，差異有統計學 意義（P＜0.05）。

2.2 參苓白術散對幼齡哮喘大鼠BALF炎癥細胞計數的影響

見表 2。模型組 BALF 中，炎癥細胞計數較 空白對照組顯著增多，參苓白術散組和地塞米松組 較模型對照組顯著降低，差異均具有統計學意義 （P＜0.05）。

哮喘是一種涉及多種炎癥細胞相互作用、許多介 質和細胞因子參與的一種慢性氣道炎癥疾病。氣道 慢性炎癥被認為是哮喘的基本病理改變和反復發作的主要病理生理基礎。過往證據表明 Th1/Th2 細胞 比例和功能失衡是哮喘主要的免疫學異常，然而， 更多的研究提示，單純的 Th1/Th2 平衡理論并不能進 行完整解釋 。近年來，Th17 分泌的促炎作用的前炎 癥細胞因子 IL-17，以及 CD4+ CD25+ Treg 分泌的抑炎 作用的 IL-10、TGF-β，是哮喘機制的研究熱點之 一 。